“威澳门尼斯人官网欢迎您” 一文掌握「小鼠葡萄糖代谢」相关试验要点
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凭据体重盘算葡萄糖溶液的用量常用剂量是 1g/kg如果一只小鼠重 30g, 那么需要给它准备 150ul 的葡萄糖了。同时保证小鼠标号清楚同时举行多只小鼠的 OGTT 实验时间的治理就尤为重要不要在识别小鼠上面浪费时间。
如果是通过口服给予葡萄糖就是 口服糖耐量试验(「oral glucose tolerance test」)简称为: 「OGTT」;如果是通过腹腔注射来给予葡萄糖就是 经腹腔注射葡萄糖耐量检测(「intraperitoneal glucose tolerance test」)简称为 「IPGTT」如果葡萄糖耐量降低机体消耗葡萄糖的能力下降在外源给予葡萄糖之后血糖相对迅速上升而下降缓慢。在临床上这个实验也十分普遍固然临床中是通过口服葡萄糖来实现的这个试验也是临床诊断糖尿病的金尺度。
相反地如果外源给予胰岛素检测特定时间段内的血糖水平 就是胰岛素耐量实验(「insulin tolerance test, insulin-induced hypoglycemia test」)简称为 「ITT」, 而外源性胰岛素的给予方式是通过腹腔注射来实现的;如果泛起了胰岛素不敏感在注射胰岛素之后血糖相对下降缓慢而上升较快。
总之OGTT 和 ITT 是两个评价代谢状态的经典实验两者划分评估了葡萄糖耐量和胰岛素反抗的情况如果葡萄糖是经由腹腔给予的那么就是 IPGTT 试验本质上和 OGTT 是一样的。
尾尖剪去 1-2mm弃掉第一滴用第二滴检测血糖;行动轻柔制止应激性的高血糖同时也可以用小刀划口子取血血糖的检测只需要 3ul如果使用毛细管引流可以收集到 30ul, 可以用于其他指标的丈量。
首先我们来相识一下 OGTT 试验如何实施。
大要上来讲小鼠的 OGTT 试验就是在小鼠空腹 12-16 小时后给予适量水平的葡萄糖后选择 6 个通例时间点监测血糖的历程。
小鼠血糖如何丈量?给予葡萄糖的量是几多?6 个时间点如何选择?多只小鼠同时举行如何协调?都是我们需要注意的问题。
1. 小鼠准备
理清了 OGTT 和 ITT 的基本观点之后我们划分看看两者是详细怎么实现的
2. 葡萄糖的准备
凭据盘算的葡萄糖的体积通过灌胃或腹腔注射给小鼠相应剂量的葡萄糖在灌胃的历程中一旦遇到任何阻力不要强行灌注极有可能误入了气管此时应该退出灌胃针重新进针。
3. 小鼠称体重
小鼠放回笼子保证富足的饮水和食物小鼠的 OGTT 实验对与它的消耗是很大的所以如果要再次举行 OGTT 或者举行 ITT 试验得话应该保证至少一周的距离时间。
4. 小鼠取血和基础血糖检侧
我们取血的途径是从小鼠尾部获得在正式举行 OGTT 试验前的一周可以举行小鼠「掐尾适应训练」, 这样小鼠在正式实验时能够从容面临从而制止应激性的高血糖。在正式试验的前一天给小鼠换上洁净的垫料饥饿 14 小时(好比前一天晚上的 18:00 正式开始饥饿越日早上 8:00 开始实验)。
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5. 给予葡萄糖
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6. 其余时间点得血糖监测
准备 10 毫升左右的 20% 的葡萄糖一定要注意是试剂级此外葡萄糖以及溶解葡萄糖的双蒸水是无菌的。
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